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為研究纖維素酶纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)與功能, 進(jìn)而深入了解天然纖維素的生物降解機(jī)
制和提高纖維素酶的生物工藝學(xué)價(jià)值, 采用PCR 技術(shù)體外擴(kuò)增了攜帶微紫青霉外切葡聚糖纖維二
糖水解酶é (CBH é ) CBD 編碼區(qū)的DNA 片段, 將CBD 編碼區(qū)DNA 片段插入帶有E rw in ia
ca rotovora pe1B 前導(dǎo)肽序列的大腸桿菌質(zhì)粒pKK2tac2new 上進(jìn)行了表達(dá)L攜帶微紫青霉CBDCBHé
編碼區(qū)的大腸桿菌重組菌株DH5A(pKK2tac2new 28) 產(chǎn)生有活性的分泌型CBDCBH é 蛋白LSDS2
PA GE 檢測(cè)顯示所產(chǎn)生的CBDCBHé 蛋白分子量約10. 8 kDL在IPTG 誘導(dǎo)下, 該菌株所產(chǎn)生的
CBDCBHé 蛋白含量達(dá)45. 2 m g?L , 且90% 以上的CBD 蛋白分泌到培養(yǎng)物上清液中L結(jié)晶纖維素CF2
11溶液經(jīng)CBDCBHé 處理后, 濁度比對(duì)照提高了128. 9% , 天然棉花纖維結(jié)構(gòu)經(jīng)CBDCBHé 處理后產(chǎn)生
一定程度的非水解性降解作用, 表明微紫青霉CBDCBHé 具有解聚天然結(jié)晶纖維素的作用L